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GB/T17795—2019中关于建筑绝热用玻璃棉制品抗霉菌试验方法
时间：2020-03-10来源：泰鼎恒业浏览次数：
GB/T17795—2019中关于建筑绝热用玻璃棉制品抗霉菌试验方法
B.1范围本试验方法适用于确定玻璃棉制品及其贴面在适合霉菌生长的条件下抵抗霉菌生长的能力。
本试验方法基于试样表面霉菌生长情况进行合格判定。
B.2仪器设备
恒温恒湿培养箱、冷藏箱、高压灭菌锅、离心机、喷雾器、生物安全柜（也可用超净工作台）、无色玻璃试管、放150mm无色玻璃培养皿、离心管、接种环、酒精灯。
B.3培养基和洗脱液
B.3.1试验用培养基
本方法采用马铃薯-葡萄糖琼脂培养基（PDA）,可选用外购商品。PDA基本成分见表B.1.
表B.1PDA基本成分
单位为克
| 基本成分 | 含量 |
| 马铃薯淀粉 | 5.0 |
| 葡萄糖 | 20.0 |
| 琼脂 | 20.0 |
| 氯霉素 | 0.1 |
| 注：表中的PDA基本成分是指1000ml培养基所含。 | |
B.3.2洗脱液
用100份蒸馏水加0.005份分散剂，吐温80和二辛磺化丁二酸(Dioctyl Sodium Sulphosucci-nate),任选一种.按10ml/支分装到无色玻璃试管中，放入高压灭菌锅于121℃、0.1MPa~0.11MPa灭菌30min后备用。
B.4试验样品准备
B.4.1活力对照样本
在实验过程中用3张50mm×100mm的无菌滤纸作为霉菌活力对照样本。
B.4.2试样
制备50mm×100mm.厚度10mm的试样3块，切裁时确保被测表面不被损坏。
B.5霉菌菌种培养与孢子悬浮液制备
B.5.1试验用菌种
试验用菌种见表B.2。
表B.2试验用菌种
| 序号 | 中文名称 | 拉丁名称 |
| 1 | 黑曲霉 | Aspergillus niger |
| 2 | 杂色曲霉 | Aspergillus √ersicolor |
| 3 | 黄曲霉 | Aspergillus fla√us |
| 4 | 球毛壳霉 | Chaettomium globosum |
| 5 | 绳状靑霉 | Penicillium funiculosum |
| 根据产品的使用要求，可增加选用其他菌种作为检测菌种，但试验菌种均应由国家级菌种保藏管理中心提供. | ||
B.5.2菌种制备与保識
B.5.2.1菌种制备
菌种和冻干孢子按提供者的建议进行操作和贮存,接种试管上应标明菌种的接种日期，接种在生物安全柜里操作（也可用超净工作台）。
B.5.2.2菌种保藏
将菌种分别接种在PDA斜面上，在2℃〜10℃可以保藏4个月.制备孢子悬浮液的菌种,从接种试管上标明的接种日期算起，在（30±2）℃下培养不少于√d,但不超过28d.
B.5.3霉菌孢子悬浮液的制备
B.5.3.1在制备霉菌孢子悬浮液前，不应取下装有菌种的试管塞子，每打开一支只应供制备一次悬液。应使用洗脱液制备孢子悬浮液。
B.5.3.2将一支制备好的无菌水洗脱液试管中的无菌水洗脱液倒入一支斜面菌种中，用无菌接种环在无菌操作条件下轻刮菌种表面以洗出孢子，把洗出的孢子倒入无菌三角瓶中，将试验需要的几种霉菌孢子液都收集到该三角瓶中。
B.5.3.3振荡三角瓶以充分混匀孢子混合液，并使成团的包子分散。孢子混合液用快速纤维滤纸过滤除去菌丝碎片、琼脂块和孢子团。
B.5.3.4以4000r/min的速度离心已过滤的孢子混合液，去掉上层清液，用50ml无菌水沉淀悬浮物,再离心.用此方法清洗孢子三次,混合的孢子液用无菌水稀释.制备的孢子悬浮液应含有孢子8.0×105CFU/ml~1.2X106CFU/ml。
B.5.3.5孢子悬浮液每次可以制备新鲜的，或者放在2℃〜10℃的冰箱中.但在接种样品前孢子悬浮液的存放时间应不超过4d。
B.6试验过程
B.6.1培养基平皿的准备
选择Ф150mm的玻璃培养皿，将足够的PDA倒入灭菌培养皿中，培养基厚度为3mm〜6mm,凝固后待用(48h内使用)。
B.6.2接种
B.6.2.1霉菌活性控制
把无菌滤纸，平放在凝固的培养基上，用装有新制备的混合孢子悬液的喷雾器喷孢子悬液,使其充分均匀地喷在培养基和滤纸上。
在温度28℃，相对湿度90%以上的条件下培养√d,滤纸条上应明显有菌生长，否则试验被认为无效，应重新进行试验。
B.6.2.2试样试验
将试样铺在培养基上，测试面朝上。将孢子悬浮液均匀的喷到整个样品与周围培养基的表面，每个测试样品应接种0.5ml左右孢子悬浮液。每个样品做3个平行试验。
以上样品在温度(30±2）℃,相对湿度不低于90%条件下培养28d.若样品长霉面积大于10%,可提前结束试验。
B.7结果观察
试验结束后，从培养箱取出样品，直接用40倍放大镜观察试样表面霉菌、菌体、菌丝生长情况，并应按以下等级评定及表述长霉程度：
0级——不长，即放大40倍下未见霉菌生长；
1级——痕迹生长，但生长覆盖面积不大于10%;
2级——生长覆盖面积大于10%。
