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涂膜耐霉菌性测定法—霉菌菌种及混合霉菌孢子（种子）悬浮液的制备
时间：2019-05-23来源：泰鼎恒业浏览次数：
霉菌菌种及混合霉菌孢子（种子）悬浮液的制备
(1)检验菌种试验中内、外墙漆膜的试验菌种见表18-6-38、表18-6-39。
①菌种制备与贮存
a.菌种制备。菌种和冷冻干孢子应按提供者的建议进行操作和贮存，接种试管上需标明菌种的接种日期，接种需要在生物安全柜里操作（也允许用超净工作台）。
b.菌种贮存。马铃薯-蔗糖培养基斜面保藏的菌种可以贮存在3〜10℃的冰箱中4个月。制备孢子悬浮液的菌种，从接种试管上标明的接种日期算起，应在室温条件下培养不少于7d，但不超过28d。
②霉菌孢子悬浮液的制备
a.在制备霉菌孢子悬浮液前，不能取下装有菌种的试管塞子，一支打开的菌种试管应只制备一次孢子悬浮液。
b.应使用无菌水制备孢子悬浮液。
c.将一支按18.6.16.4 (4)制备好的无菌水试管中的无菌水倒入一支斜面菌种中，用无菌接种环在无菌操作条件下轻刮菌种表面以洗出孢 子，把洗出的孢子液倒入无菌三角瓶中。将试验需要的几种霉菌孢子液都收集到该三角瓶中。
d.振荡三角瓶以充分混匀孢子混合液，并使成团的孢子分散。孢子混合液用快速纤维滤纸过滤除去菌丝碎片、琼脂块和孢子团。
e.以4000r/min的速度离心已过滤的孢子混合液，去掉上层清液。用50mL无菌水沉淀悬浮物，再离心。用此方法清洗孢子三次。混合的孢子液用无机营养液稀释，制备的孢子悬浮液应含有孢子8 X105〜1.2 X106 cfu/mL。
f.孢子悬浮液每次可以制备新鲜的，或者放在3〜10℃的冰箱中，但在接种样品前孢子悬浮液在冰箱中的存放时间不能超过4d。
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